Для оцінки рівня споживання тютюну досліджують концентрацію нікотину та його метаболітів. Нікотін та його метаболіти можуть бути досліджені в крові, слині, сечі, а також придатках шкіри (волосся та нігті).

Для визначення нікотину та його метаболітів у сечі можуть бути використані різні методи: газова хроматографія/мас-спектрометрія (ГХ/МС), рідинна хроматографія/мас спектрометрія (РХ/МС), радіоімунний аналіз, імуноферментний аналіз та інші.

Після куріння відразу падає вміст лейкоцитів, а рівень еритроцитів навпаки збільшується. При дослідженнях буде виявлено підвищену в'язкість крові, що відбивається на стані судин. Зміни структури не залишаться непоміченими і неодмінно спотворять результати.